Appréciation histopathologique des stents à portière d’acerbe rétinoïque chez un modèle d’artériole coxal de lapin

L’examen a été manoeuvre à juste titre aux directives ARRIVE²⁴ et la charte de l’Confusion communautaire²⁵ En second le type des 3R (amoindrir, parfaire, rénover) dans mettre : le débordement d’élevage utilisés est enfoncé, les techniques expérimentales et à eux hasard de vie sont améliorées quelque qu’elles-mêmes soient réduites au maximum chez la tristesse ou la triste. Les expériences ont été intrigue à la Élévation de soigné biomédicale de l’Université d’Athènes, Grèce/Athènes. Le pacte a été donné par le séminaire d’aperçu du pacte des instituts de soigné biomédicale de l’Université d’Athènes, en Grèce, et la auspice de la diplomatie foncier et vétérinaire de la division d’Attique, en Grèce, une considération authentifiée. Toutes les méthodes ont été réalisées à juste titre aux directives et réglementations nationales et internationales pertinentes.

façon stent

Des stents intravasculaires ont été implantés chez les artères coxaux de 30 lapins mâles néo-zélandais (2,5 à 3,5 kg). Le modèle d’artériole coxal de lapin a été orné puis originaire expérience dans l’aperçu préclinique des stents à portière RA étant donné que la ébranché et la bulle aux lésions chez les artères coxaux de lapin sont incomplètement similaires aux artères coronaires humaines.^22,26. Les élevage ont été logés séparément chez des cages en métal ininflammable. Couple stents du même assemblé ont été implantés dans quelque lapin, un stent chez quelque artériole coxal. Soixante stents ont été utilisés au plénier, qui ont été divisés en dix origines, six stents par assemblé et triade élevage par assemblé. La époque d’glose alors la exode subsistait de 4 semaines.

Recette d’établissement de stent

Les lapins ont été anesthésiés par perfusion intramusculaire de kétamine (35 mg/kg) et de xylazine (7 mg/kg) et surveillés par oxymétrie de battement sphérique peropératoire. Quelques-uns avons servant une procédé publiée dans l’avenue vasculaire percutané²⁷. En abrégé, les élevage ont été placés en décubitus dorsal, immobilisés. Les une paire de oreillettes ont été rasées et stérilisées pour de la povidone iodée. Un surnuméraire jeune et un cancérologue interventionnel achevé ont créé un avenue vasculaire trans-auriculaire, une angioplastie sélective et l’établissement d’un stent chez l’artériole coxal.

dans les implants premiers et quelque d’arrêter un locus lapidaire du pylône, pour que de assembler les moment importants à une examen simultané visant à étendre une contrefaçon in silico du progrès de expansion²⁸ La stratigraphie par harmonie visuel (OCT) post-procédurale a été réalisée sur un collant débordement de stents (Ν = 4). La accomplissement et les matériaux utilisés dans l’résection ont été larme modifiés dans les cas chez auquel l’OCT a été réalisée.

L’artériole petit doigt aciérie a été ponctionnée pour un cathéter varié de ajustage 22 quasi chez la demi distale de son route hypodermique. Derrière, l’colonne aciérie du cathéter a été furtive. Un fil de pilotage plongeant de 0,018 assez de laize (V18, Boston Scientific, MA) a été précisément identifié chez l’artériole carotide apparence et l’arc aortique/aortique chérubin, comme chez l’aorte thoracique. Le cathéter a été inhabité et une boutonnière de 3 cm a été pratiquée à commencer du pelage au conclusion de impôt ancienne le vaste du route du fil de pilotage jusqu’à la soutien du dos. Pour les cas où l’OCT devait abstraction réalisée, une aérienne écaille de 0,035 assez conciliable F de 0,035 assez (Terumo, Tokyo, Japon) a été insérée chez l’artériole carotide apparence alors des dilatations en gamme siècle par siècle à l’instrument d’un exerciseur de écaille égoïste. Des extensions répétées ont été réalisées sur le fil dans repousser la objet sphérique rétrécie de l’artériole monsieur l’matricule de la écaille. Derrière, de l’héparine (100 UI/kg) a été administrée par route intra-artérielle. À l’appontage, un cathéter de pilotage 5F (Envoy MPC, Codman, Détails-Unis) a été avancé jusqu’à l’aorte distale dans extorquer une conseil droite pour les canots cibles et une artériographie a été réalisée dans accorder visiblement le laize du embarcation et puis publication de chemin dans souscrire aux canots fémoraux. Postérieurement l’artériographie, le fil a été remplacé par un fil de 0,014 assez de laize (Jaunet 2, Rountes, Huissier) et il a été poussé chez l’artériole fémorale. Bref, le stent subsistait administré et posé, à un couple de millimètres de l’formation de l’artériole coxal (10 r, 20 s). Postérieurement l’établissement du stent, l’OCT a été réalisée hormis généré de objection exclusivement par nettoyage pour une issue palude strictement.

Pour les cas où l’OCT n’subsistait pas programmé, le progrès subsistait fidèlement le même que supra, jusqu’au conclusion d’introduction en utilisant la écaille d’reconnaissance. Un emballage Radifocus Introducer II de 0,018 assez conciliable 4-F (Terumo, Tokyo, Japon) a été servant dans payer l’AP et les activités suivantes vivaient les mêmes que celles décrites supra. Une discordant division concernait le cathéter pilote où le cathéter utile supra a été remplacé par un cathéter angiographique 4-F (Impress VER-H, Merit Medical, USA). Une artériographie conclusion a été réalisée dans accorder la orientation du stent, l’totalité des canots sanguins et la assistance de complications potentielles (ex. : étymologie de thrombus, assistance d’un guenille prévenu, stent approximativement théoriquement accru, etc.). Les élevage n’ont règlement annulé médication antiplaquettaire.

étalon d’endoprothèse

Vers disposer les cales de vapocraquage pharmacologique, les entretoises métalliques voûte en cobalt-chrome (Gagnant Comme, Roentes, Zoug, Huissier) de dimensions 12 mm sur 2,50 mm de métrage ont été enrobées de travail constituées d’un embrouillé de polymère et de médication (Graphique 3) . Couple bonshommes de polymères contradictoires ont été utilisés, le polymère « A », poly(acerbe lactique-co-glycolique) (PLGA) et le polymère « B », acerbe lactique (PLA). Trio doses disparates de RA ont été utilisées pour les polymères « A » et « B », ce qui a donné triade ensembles de stents dans quelque polymère : AL, AM et AH pour respectivement une compté « critiquable », « norme » et « levée » et BL, BM, BH pour le polymère B, doses « critiquable », « norme » et « levée », respectivement. Trouvant donné que l’acerbe rétinoïque est ombrageux à la réverbération et à l’oxygène, des précautions ont été prises dans renforcer le médication en échange de la putréfaction endéans le progrès d’empaquetage et de classement. Le médication a été conditionné au-dessous une critiquable réverbération doré donc de la accomplissement des patchworks d’empaquetage. Postérieurement incrustation et apprêt aux cathéters, les systèmes de stent ont été emballés chez des emballages en publication d’alumine sombre pour des absorbants d’imprégnation et d’oxygène. Aussi de emballer la ensemble de médication sur les stents, des tests de pouvoir de épithète ont été effectués alors la floraison. Couple ensembles de stents, EF et EG, ont été préparés pour la même compté d’évérolimus en utilisant respectivement les polymères A et B. Toutes les lattes peintes sont serties sur les systèmes de appariement de lattes Gagnant Comme de Rontis aux dimensions de 2,5 x 12 (REF : LP20/12).

Des stents Rontis Cobalt-Chrome en acier nu (non revêtus) et des stents fracturés Everolimus disponibles chez le succursale (Xience Pro Everolimus Eluting Coronary Stent System, Abbot Vascular, Santa Clara, USA) de la même ébranché (assemblé C et D, respectivement) ont quand été utilisés. . Les bonshommes de stent, les formulations de incrustation et les doses de médication dans les éléments testés sont interprété chez le affiche 3.

Morphologie et génétique

Les élevage ont été euthanasiés par perfusion de pentobarbital sodique. Les autopsies ont été réalisées par un vétérinaire achevé. Des sections d’artères traitées ont été recueillies et conservées chez du aldol affranchi innocent à 10 % et transférées dans un enchaînement cytologique, une étude d’figure et une aperçu cytologique. L’génétique et la morphométrie ont été réalisées chez un chantier crâne certifié BPL (Anapath Dettes, GmbH, Huissier) par un pathologiste vétérinaire certifié. Les échantillons prélevés sur les sites d’établissement ont été traités en couvrant de la baume de méthacrylate de méthyle (MMA), sciés par une refrain à lien diamantée chez le connotation latéral de l’typique (ordre établi EXAKT), comme fraisés et polis jusqu’à une hauteur conclusion d’comme ci comme ça 40 à 60 μm (ordre établi EXAKT ). Une portion de quelque typique a été bavarde pour un fardant Paragon contesté en second les modes opératoires normalisé. Une aperçu des lames dans le pouvoir de la épithète a été effectuée, comme les lames ont été transférées au pathologiste de l’examen dans une aperçu de la pathologie.

Paramètres d’aperçu

Les paramètres évalués par audition histopathologique qui ont été adaptés au ordre établi de note décrit chez la principe ISO 10993-6:2016 vivaient : réaction artérielle [endothelial loss (%), surface (fibrin/platelet thrombus), intima proliferation, smooth muscle in intima proliferation, proteoglycan/collagen]Angéite (endothélium/média, Additionnel), saignement de cellules musculaires lisses médiales (SMC) [Medial SMC loss (transmural), Medial SMC loss (circumference)], Tissus artériels de roulement cellulaire (protéoglycanes, scléroprotéine, accidentel), ruade de l’visiteur associée à la exode (cellules pléomorphes, lymphocytes, plasmocytes, macrophages, cellules géantes, ulcère, fibrose, congestion percutanée/cumul de fibrine, néovascularisation, infiltrats glutineux, dissidence de la couteau comprimable (EL) (dissidence EL apparence, dissidence EL prévenu), dramatisation médiale (foyer, diffuse). Un ordre établi de note contesté a été appliqué, décrit chez la principe ISO 10993-6 : 2016. Tout paramètre a été noté de 0 à 4 en place des résultats histologiques. Résolue par la principe ISO 10993-6:2016, la antinomie de classement est comprise compris 0,0 et 2,9 pas de ruade ou peu de ruade de l’visiteur, 3,0 à 8,9 fataliste ruade de l’visiteur, 9,0 à 15,0 ruade polie de l’visiteur et ≥ 15,1 ruade indécis de l’visiteur proportionnellement aux matériaux de liste.

Un numériser de diapositives Olympus Slideview VS200 pour une caméra Olympus U-TV1XC et un intègre 20 × a été servant dans scanner des échantillons artériels. L’aperçu quantitative a été réalisée à l’instrument du package d’imagerie et d’étude d’images Olympus cellSens v1.18.

L’aperçu quantitative a été réalisée en analysant des images sur quelque artériole, y reçu les paramètres suivants : EEL ; µm²), une circonscription à l’civil de la couteau comprimable prévenu (IEL ; µm²), lumen (μm²), édredon (micron .)²) (évaluation : IEL-lumen), média (µm²) (évaluation : EEL – IEL), sténose (%) [calculation:100 − (100 × Lumen/IEL)], l’hauteur interne (µm) (résolution norme de 10 mesures d’hauteur quasi équidistantes). Les libertés moyennes arithmétiques ont été utilisées dans d’changées statistiques descriptives. Les pictogrammes pour les mesures, un dans quelque assemblé, sont périodiques à la blason 3. Avec les artères n’ont pas été dégagées donc de l’collection dans éluder la saignement de toute assistance potentielle de immobilisation locale, des globules rouges (GR) vivaient présents chez la réverbération de contradictoires artères. .

analyses statistiques

Les tests statistiques ont été effectués à l’instrument du package Prism 8 (GraphPad, San Diego, CA, USA). Des statistiques descriptives de la circonscription aciérie, de la circonscription prévenu, de la sténose et de l’hauteur prévenu ont été utilisées. Le expérience de Shapiro-Wilk dans la norme a été créé. Pendant les moment suivaient une vente ordinaire, des comparaisons ont été faites pour un expérience t non apparié. Pendant les moment ne suivaient pas une vente ordinaire, le expérience de Mann-Whitney a été servant. Une résolution de p inférieure à 0,05 subsistait considérée puis manifeste.